直播回放 | 3D组织荧光成像：新一代组织透明化技术及其应用

2024年4月2日下午2点，丁香园联合天根、海卓开展主题为「单细胞测序携手 3D 组织成像：应用技巧与高分案例分析」的线上直播。本次直播为您介绍单细胞测序与空间组学联用的精彩案例，借此了解空间蛋白表达的前沿工具——组织透明化技术。

基于组织透明化的三维成像技术作为一种研究空间蛋白表达的前沿工具，可与二代测序、单细胞测序、空间转录组等技术相结合，广泛应用于神经、肿瘤、心血管等领域。并介绍几个发表于顶尖期刊的应用案例，帮助您深入了解技术原理及发展历程。

互动问答

直播过程中，针对大家的提问，各位专家也相应做了精彩解答（解答部分）

Q1：目前组织透明化较多应用于哪些科研领域？相对于其他空间技术最大的优势在哪里？

A: 组织透明化技术应用广泛，主要领域有神经科学、发育生物学、病理学和疾病研究、免疫学、再生医学、器官移植等；比如在神经领域呢，能够可视化神经回路并绘制脑部神经连接，有助于理解脑部功能和神经系统疾病。在肿瘤研究中呢，相当于传统二维病理研究的迭代，三维的空间信息可应用于研究肿瘤的微环境、细胞组成、异质性等。在免疫学应用中，可以可视化免疫细胞或者药物的分布。

主要优势是能够可视化并量化蛋白的空间表达，并且应用于透明化的组织可以在尺寸上相对较大，如小鼠脑等。

 Q2：免疫荧光的建议？

A：抗体标记是一个很重的步骤，可以提前在组织切片上做染色测试，基于测试结果进行抗体以及合适浓度的选择。另外，海卓生物可以提供荧光标记辅助试剂盒供您选择。

Q3：针对大型或复杂生物组织（如整个器官或胚胎），一般如何优化透明化和成像流程以确保高分辨率、深度穿透和全组织覆盖？

A：主要从组织透明化方法和成像技术两个方面考虑。目前已发表的文献中，有机溶剂型的方法是透明程度最高的方法，发表的文献中可以处理整鼠样本。从将来的发展来看，提高折射率匹配的效率可以提高透明化效果。另外，可以优化实验步骤达到最佳的透明化效果；包括增加处理步骤的时间，以及提高抗体标记步骤的染色效果。在光片成像过程中，选择合适的荧光通道来提高成像效果。

     海卓生物可以提供全流程的样本处理服务，以最佳的透明化和成像效果使您满意。

试用装

关于海卓生物

海卓生物基于国际领先的有机试剂组织透明化技术，开发出新一代国产化组织透明工具，广泛适用于各种模式动物及人的组织器官透明化，操作简单，染料和抗体渗透能力强。为科研和临床提供全套透明化解决方案。