组织透明化应用 | 《nature》全人眼透明化技术与光片荧光显微镜成像

在医学研究和临床诊断中，对眼睛结构的深入理解至关重要，然而，传统的组织学方法受限于其二维视角和复杂的三维重建过程。近期，一项创新的研究为我们提供了一种全新的视角——通过全人眼透明化技术结合光片荧光显微镜（LSFM），实现了对整个人类眼睛的三维（3D）重构和定制化观察。

背景

眼睛作为一个复杂的生物结构，其内部结构包括神经元、血管、胶质细胞等，相互交织在一个胶原屏障和玻璃体凝胶之间。传统的眼部组织病理学因其异质性和眼球的球形特性，三维重建过程繁琐且容易产生误差。透明化技术的发展为完整眼球的组织学研究提供了一种优雅的解决方案。

透明化技术

研究团队开发了一种针对完整人眼的ClearEye透明化技术，该技术通过结合改进的iDISCO+透明化方法、精细化的漂白程序和使用线性化改进的抗体穿透，实现了整个人类眼睛的免疫标记及LSFM，这项技术不仅提高了抗体的穿透力，还解决了眼睛中高浓度黑色素的漂白问题。结合了改进的iDISCO+透明化、精细的漂白过程，并使用线性化技术提高抗体穿透性，再经过图像采集和数值解剖，实现了对构成眼球的组织的多尺度、定制化观察。

图1. ClearEye透明化技术概述及成像

全眼透明化

首次实现了整个人类眼睛的透明化，包括视网膜血管化、脉络膜复杂血管组织等。通过后处理LSFM堆栈，实现了多尺度、定制化的观察，从视网膜的血管化到脉络膜的复杂血管组织，从黄斑无血管区到多层的视网膜和脉络膜循环，这些结构都被清晰地定义和可视化。

图2.眼前段样本的透明化及成像

结论

人眼的透明化和完整成像不仅克服了传统眼部组织学的限制，还为眼科病理学和研究提供了一个强大的工具，在医学和基础研究中有广泛的适用性，它允许研究者在细胞分辨率下观察完整的人类眼睛，有助于更好地理解眼部疾病的表型，为临床成像与组织病理学之间架起了桥梁。

试用装

关于海卓生物

海卓生物基于国际领先的有机试剂组织透明化技术，开发出新一代国产化组织透明工具，广泛适用于各种模式动物及人的组织器官透明化，操作简单，染料和抗体渗透能力强。为科研和临床提供全套透明化解决方案。