常见问题

试剂是否安全？

根据美国国立卫生研究院(NIH)公开化学数据库、美国食品和药物管理局 (FDA) 相关规定以及欧盟危险品认证标准67/548/EEC，Hyaline™所有试剂均属常规化学品，相关成分已广泛用于化妆品、食品香精和添加剂。使用和储存Hyaline™试剂时请遵循说明书。对于敏感人群，使用时可佩戴安全护目镜和双层丁腈手套。

组织透明化所涉及实验耗材的材料有哪些注意事项?

使用Hyaline™组织透明化试剂盒，需用聚丙烯、聚四氟乙烯材料（实验室通用15ml/50ml离心管即符合条件）或玻璃的实验耗材，使用聚苯乙烯材料（如多孔板）会导致耗材溶解对透明化效果有严重影响。

取样及样本固定有哪些注意事项？

取样前需要进行灌流处理，有助于获得更好的透明化效果。取样后在4%多聚甲醛溶液中4℃过夜固定，随后更换到PBS或65%乙醇溶液中4℃保存。不建议在4%多聚甲醛溶液中固定超过2周。

抗体能否均一渗透厚度大于1mm的组织？

Hyaline™组织透明化试剂可高效通透组织，大分子抗体渗透深度可达1.5cm（组织厚度大于1.5cm请联系我们技术支持）。优化工作浓度可实现多种抗体的均一的荧光标记效果，避免样本表面和内部信号强度差别大的问题。

抗体染色一抗选择有哪些注意事项？

优先选择免疫荧光或切片验证过的一抗，且工作浓度一般是免疫荧光或切片浓度的1/2。若需要推荐抗体，可联系海卓生物咨询，海卓生物也可以提供定制化抗体服务。

抗体染色必须使用海卓的荧光标记辅助试剂盒吗?

推荐客户务必使用海卓荧光标记辅助试剂盒，海卓试剂是有机体系，尤其是做全器官样本时，比如全脑、全心脏等组织，试剂中的成分能提高抗体的穿透性，做组织器官染色的时候标记更均匀，减少边缘和核心的标记差别。如果无法满足，组织很小很薄用客户熟悉的方法也可以尝试，海卓不做成功率保障。

样本透明化检查时间节点是什么？样本透明化后如何保存？

请严格按照说明书步骤进行实验操作，直到最后一步折射率匹配完成后且样本完全浸泡于折射率匹配溶液（D/D+）或成像液中可观察到样本透明，其他任何实验节点样本均不透明。样本完成透明化进行成像时应浸泡于成像液中，样本可长期室温保存于成像液中。

组织透明化处理后可以产出什么类型的数据？

荧光标记组织透明化后的样本类似于3D病理切片，可以三维全角度观察和定量完整组织器官内特定蛋白的表达，和特定细胞类型在组织内的分布。结合光片显微镜成像，可产出高分辨率的三维图片，全景视频，和定量分析结果。

透明化服务业务有无关于成功率的保障？

服务业务提供成功率保障，若样本透明度不及预期，免费重做。

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